巴斯德吸管(巴氏吸管/滴管)是实验室很常用的移液工具,分一次性塑料巴斯德吸管和玻璃巴斯德吸管,使用方法和注意事项略有差异,核心是精准移液、防污染、防交叉感染。
一、基本结构
一次性塑料巴斯德吸管:一体成型,带吸球(乳胶/硅胶)+细管+尖端,容量多为1mL、2mL、3mL,带刻度(部分)。
玻璃巴斯德吸管:玻璃细管+乳胶吸球,可重复使用,需配套洗耳球/吸球。
二、通用使用方法(以一次性塑料吸管为例)
1.准备
检查包装:确认未破损、未过期、无菌(无菌操作时)。
选择规格:根据移液体积选对应容量(如1mL、2mL)。
佩戴防护:手套、护目镜、实验服,避免液体接触皮肤/眼睛。
2.吸取液体
手持吸管中部,避免触碰尖端和吸球连接处。
用拇指和食指轻捏吸球,排出内部空气。
将尖端垂直浸入液面下2–5mm(不要太深,防止吸球污染;不要太浅,防止吸空)。
缓慢松开吸球,液体被吸入管内,液面不要超过吸球连接处(防止液体进入吸球,造成污染/腐蚀)。
如需定量:
有刻度:吸至目标刻度线(视线与刻度线水平,读取凹液面最低点)。
无刻度:按经验/滴数控制(1mL≈20滴,仅供粗略估算)。
3.释放液体
将吸管尖端垂直/倾斜对准接收容器内壁(避免溅出)。
轻捏吸球,缓慢释放液体,避免快速挤压导致飞溅。
如需逐滴释放:轻捏吸球,控制力度,使液体逐滴落下。
释放完毕后,将吸管尖端轻靠容器内壁,吸走残留液滴(减少误差)。
4.结束操作
一次性吸管:直接放入实验废弃物桶(锐器盒/耐穿刺袋),严禁重复使用。
玻璃吸管:
先将残留液体排入废液缸,再用清水冲洗。
用铬酸洗液/洗涤剂浸泡清洗,蒸馏水冲洗3次以上。
烘干/晾干,备用;无菌操作前需高压灭菌。
三、玻璃巴斯德吸管特殊操作(重复使用)
安装吸球:将玻璃管上端湿润(便于安装),轻轻旋入乳胶吸球,确保密封不漏气。
吸取:同塑料吸管,严禁用嘴直接吸液(剧毒、腐蚀、生物样品风险很高)。
清洗灭菌:
先吸清水冲洗3–5次,再吸75%乙醇/消毒液冲洗,最后蒸馏水冲净。
干燥后,干热灭菌(160℃,2h)或高压蒸汽灭菌(121℃,20min)。
灭菌后存放于干燥器/无菌盒,避免二次污染。
四、核心注意事项(必看)
1.防污染(最关键)
一管一用:一次性吸管严禁重复使用;玻璃吸管不同样品/试剂必须更换/灭菌后再用,防止交叉污染。
禁止混用:吸取过酸、碱、有机溶剂、生物样品的吸管,不可直接吸取其他试剂。
无菌操作:微生物实验、细胞培养时,必须用无菌巴斯德吸管,操作在超净台/无菌室进行,避免触碰非无菌区域。
2.安全操作
严禁口吸:所有液体(包括水)禁止用嘴直接吸取,必须用吸球/移液器,防止中毒、感染、腐蚀。
防溅防漏:
吸取挥发性、腐蚀性、有毒液体(如浓酸、浓碱、有机溶剂、病原微生物)时,在通风橱内操作。
吸液时不要超过吸球连接处,防止液体进入吸球,导致吸球腐蚀、液体倒吸污染。
释放时轻捏慢放,避免液体飞溅到皮肤、眼睛或实验台。
防破碎:玻璃吸管轻拿轻放,避免碰撞;破碎后用镊子/戴手套清理,放入锐器盒。
3.精准移液
视线水平:读取刻度时,视线与凹液面平齐,避免俯视/仰视造成误差。
垂直吸放:吸取和释放时尽量垂直,减少管壁残留;释放时靠壁,减少误差。
避免气泡:吸液时缓慢松开吸球,防止产生气泡;如有气泡,轻弹管壁排出后再移液。
定量精度:巴斯德吸管为粗略移液工具(误差±5%–10%),高精度定量(如<1%误差)必须用移液器/移液管。
4.储存与维护
一次性吸管:未使用的存放在干燥、阴凉、避光处,避免高温、潮湿。
玻璃吸管:
清洗后彻底干燥,防止发霉、残留液体腐蚀。
灭菌后尽快使用,超过保质期需重新灭菌。
吸球定期检查,如有老化、开裂、漏气,及时更换。
5.特殊液体操作
挥发性液体(如乙醚、乙醇):在通风橱内操作,吸液后快速密封,避免挥发。
粘稠液体(如甘油、血清):选择粗尖端吸管,缓慢吸放,必要时加热(不超过60℃)降低粘度。
生物样品(如细胞悬液、血液):轻柔操作,避免剧烈挤压导致细胞破裂;使用后按生物安全规范处理。
酸碱/有机溶剂:
塑料吸管:避免长期接触强氧化剂(如H₂O₂)、强有机溶剂(如甲苯、二甲苯),防止吸管变形、溶解。
玻璃吸管:耐酸碱,但避免骤冷骤热(如热酸直接用冷水冲),防止炸裂。
五、总结
巴斯德吸管的核心使用原则:一管一用防污染,轻捏慢放防飞溅,严禁口吸保安全,视线水平求精准。
日常粗略移液、滴加、转移:首选一次性塑料巴斯德吸管,方便快捷、防污染。
无菌、重复使用、特殊试剂:选玻璃巴斯德吸管,严格清洗灭菌。
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